Determinación del efecto inhibidor sobre α-amilasa de extractos de un cultivo celular de Arnica montana

Abstract

Arnica montana (Asteraceae) es una planta medicinal de origen europeo que se utiliza principalmente como antiinflamatorio. De esta especie se han identificado un gran número de metabolitos, entre los que se encuentran algunos ácidos fenólicos como el ácido clorogénico y cafeico, los cuales inhiben la actividad de la enzima α-amilasa. La α-amilasa es una enzima involucrada en la digestión de carbohidratos de forma que se libera glucosa al torrente sanguíneo para su posterior absorción. Sin embargo, cuando se padece diabetes mellitus (DM), la insulina no es capaz de captar la glucosa y llevarla a las células por fallas en su secreción o acción, haciendo que el organismo permanezca en un estado de hiperglucemia crónica. Este padecimiento es una problemática de salud mundial y económica que va en aumento en la población de todo el mundo, debido a que es responsable de disfunciones en diversos órganos como en ojos, riñones, corazón, entre otros. Por ello se requiere la búsqueda de nuevas alternativas de tratamiento de la DM, entre los que se encuentran el estudio de metabolitos secundarios obtenidos de plantas medicinales, con la capacidad de actuar como inductores de síntesis, secreción y sensibilizadores de insulina o como inhibidores enzimáticos, tales como los inhibidores de la α-amilasa. Arnica montana es una planta medicinal en la que se han identificado metabolitos secundarios tipo monoterpeno, lactona sesquiterpénica, flavonoide, cumarina y ácidos fenólicos, éstos últimos reportados en otras especies como inhibidores de α-amilasa. En el presente trabajo, tres fracciones (4AM, 5AM y 6AM conteniendo compuestos fenólicos) de un extracto metanólico del cultivo celular de A. montana, fueron estudiadas para determinar si presentaban efecto inhibidor de α-amilasa. Para ello las tres fracciones se probaron en cinco concentraciones (2.5, 10, 20, 50 y 100 µg/mL). Se empleó ebullición para inactivar la enzima y se agregó agente colorimétrico capaz de unirse a los azúcares reductores producidos por la actividad catalítica de la enzima. Se determinó la absorbancia para estimar el porcentaje de inhibición de la enzima. Los resultados indican que únicamente la concentración de 10 µg/mL inhibió la actividad de la α-amilasa en las tres fracciones (4AM, 5AM, 6AM a 12.12%, 1.66%, 11.95% respectivamente), efecto que se correlacionó al contenido de compuestos fenólicos totales y ácidos fenólicos totales; por lo que es probable que la línea celular esté produciendo ácidos fenólicos reportados para A. montana, tales como el ácido cafeico, ácidos 3,4 dicafeoilquínico, 4,5 dicafeoilquínico y 3,5 dicafeoilquínico y que de acuerdo a la literatura ya han demostrado actividad inhibitoria en α-amilasa. Aun cuando esta especie no se usa ampliamente contra la DM, este es el primer estudio que reporta la capacidad inhibitoria de α-amilasa por compuestos extraídos de un cultivo celular de A. montana.