Identificación in silico de la red de interacción de factores de virulencia PLD y CP40 de Corynebacterium pseudotuberculosis aislado mexicano 2J

Abstract

La Linfadenitis caseosa (LAC) es una enfermedad bacteriana que afecta principalmente a pequeños rumiantes, cuyo agente causal es Corynebacterium pseudotuberculosis (C. pseudotuberculosis) biovar ovis. La enfermedad se presenta de forma cutánea y/o visceral, siendo en la primera característica la formación de abscesos en nódulos linfáticos subcutáneos, los cuales son visibles y palpables a través de la piel y su localización depende del punto de entrada del microorganismo. Las lesiones pueden aparecer como abscesos organizados, con inflamación, encapsulación fibrosa, pérdida de pelo sobrepuesto y ruptura eventual, dando como resultado la descarga de contenido purulento. En la forma visceral, los abscesos tienen lugar en los nódulos linfáticos internos, así como en pulmones, hígado y riñones, causando deterioro en la condición orgánica del animal hacia el desarrollo de un curso crónico. En el establecimiento de la infección se requiere de la adhesión a las células del hospedero, multiplicación intracelular, diseminación a otros tejidos y persistencia. Las proteínas PLD y CP40 constituyen factores de virulencia principales de C. pseudotuberculosis ovis, consideradas proteínas exportadas o secretadas por la bacteria, que favorecen la infección ya sea involucradas en la adhesión e invasión de las células del hospedero, en la adquisición de nutrientes, toxicidad y en la evasión del sistema inmune. Aun se continúa con el estudio de los factores de virulencia de C. pseudotuberculosis, para establecer el conjunto de proteínas que participan en interacción para el establecimiento de la infección bacteriana. En los últimos años la ovinocultura mexicana se ha fortalecido de manera considerable, por lo que las investigaciones se han dirigido al estudio de patógenos que afectan la producción de pequeños rumiantes. La Linfadenitis caseosa es una enfermedad que se encuentra presente en el territorio mexicano y es considerada una de las enfermedades infecciosas económicamente más importantes que afecta la producción ovina y caprina. En México diversos estudios han demostrado la presencia de la LAC en los rebaños ovinos y caprinos en diferentes regiones del país. En el 2015 se realizó la identificación de 57 aislamientos de C. pseudotuberculosis de un total de 160 muestras procedentes del Estado de Jalisco. Las cepas se identificaron mediante bacteriología miniaturizada API Coryne, pruebas bioquímicas y PCR, obteniéndose una frecuencia del 33%. También se ha realizado la secuenciación del genoma completo de seis cepas de origen mexicano, de diferentes biovares, aisladas de diferentes hospederos, cuyas secuencias se encuentran reportadas en la base de datos del GenBank, donde el análisis filogenético agrupo cada una de las cepas en función del tipo de biovar, y en el caso de las cepas biovar ovis no se agruparon en función de su cercanía geográfica. Las cepas biovar ovis contienen un elevado grado de clonalidad, pero no presentan el mismo grado de agrupación filogenética en los clados que las cepas biovar equi. Además, en este trabajo la comparación del genoma de 46 cepas permitió identificar dos clusters de genes que podrían ser empleados para la diferenciación de las cepas biovar equi (cluster: CRISPR Cas) y biovar ovis (cluster: proteínas de tipo III de Restricción-modificación). El estudio de C. pseudotuberculosis ovis para el establecimiento de factores virulencia, permite entender cuáles son las estructuras y moléculas que le confieren la capacidad a la bacteria para causar la enfermedad. Establecer la interacción de estas proteínas con otras moléculas de la bacteria aumenta las posibilidades de determinar posibles moléculas candidatas para el desarrollo de medios diagnósticos y vacunas.