Determinación de la expresión de respuesta inmune inespecífica mediada por ifn tipo i (ifn-i(α)) en salmónidos, ante la infección por el virus de la necrosis pancreática infecciosa (ipnv)

Abstract

El virus de la necrosis pancreática infecciosa (IPNV) es un Birnavirus que causa una enfermedad que afecta predominantemente a peces salmónidos jóvenes. Su genoma está compuesto por dos segmentos de RNA de cadena doble (dsRNA) que codifican cinco proteínas; el segmento A codifica VP2, VP3, VP4 y VP5, mientras que el B sólo codifica a la VP1. La respuesta celular contra IPNV activa IFN-I(α) y ISGs mediante la vía JAK-STAT. Variaciones en la temperatura del agua impactan la fisiología de la trucha arcoíris (Oncorhynchus mykiss) incluyendo su tasa metabólica y la respuesta inmune específica pero se desconoce su efecto sobre la respuesta inespecífica, considerada el medio de defensa más importante para peces. Con objeto de conocer la respuesta inmune inespecífica mediada por IFN-I(α) en salmónidos ante la infección con IPNV, se realizó un ensayo in vivo para conocer el efecto de la temperatura sobre la replicación viral y la expresión de ISGs. Otro estudio in vitro utilizando células RTG-2 se llevó acabo para determinar el efecto de la virulencia de dos serotipos de IPNV sobre la activación de la Y-701 STAT1(α/β). De acuerdo a los estudios realizados, la enfermedad clínica únicamente se desarrolló a 12°C con 100% de mortalidad desde el día 6, presentándose disminución de mRNA de STAT-1 antes del día 11 en comparación con expresiones obtenidas a 8 y 16°C, además existió disminución de IFN-I(α) durante todo el ensayo comparado con valores obtenidos en peces a 16°C, que fue aumentado desde el día 2. La proteína Mx-1 se incrementó los días 2, 4, 7 y 14, comparado con los valores obtenidos a 8 y 16°C, pero no fue capaz de ejercer su actividad biológica. Los peces infectados a 16°C se mostraron normales y con apetito durante el ensayo; la relación entre el nivel de respuesta y la virulencia de la cepa viral es poco clara. En la segunda investigación, el serotipo Sp obtuvo mayor nivel de replicación que VR-299, exceptuando a las 60 hpi; contrario lo esperado, la expresión de IFN-I(α) fue mayor en células expuestas a la cepa Sp, por lo que aparentemente la virulencia de la cepa se correlaciona positivamente con el nivel de respuesta por IFN-I(α); sin embargo, la expresión de transcrito decreció en el tiempo. Sorprendentemente, el nivel de mRNA de Mx-1 no mostró diferencias significativas entre serotipos. En las células infectadas con el virus Sp, se indujo significativamente una mayor tasa de fosforilación de Y701-STAT1 (α/β) a los 4, 8,12 y 24 hpi comparados con los valores obtenidos en células infectadas con VR-299. De acuerdo con nuestros resultados, IPNV contrarresta el efecto de IFN-I(α) y algunos ISGs, interfiriendo la ruta de señalamiento JAK-STAT. Sin embargo IPNV, no bloquea la fosforilación de la tirosina 701-STAT1(α/β), contrario a otros virus de RNA.