Biosíntesis y caracterización de NPs de Ag con Eysenhardtia polystachya (palo azul) y su inhibición sobre el crecimiento de Clostridium sp

Abstract

Ha tomado auge recientemente la bio-reducción como método de obtención de nano-partículas metálicas (NPsM), debido a que es amigable con el medio ambiente y de bajo costo. Este método hace extenso uso de plantas medicinales y sus extractos, tal es el caso de Eysenhardtia polystachya, que es un arbusto nativo de Norteamérica. La bio-reducción es ampliamente utilizada para síntesis de nano-partículas de plata (NPs Ag) que destacan por sus aplicaciones bactericidas. Por otro lado, el generó Clostridium está compuesto por bacterias gram positivas, anaeróbicas, que forman esporas y toxinas muy potentes, se encuentran en la flora intestinal de animales y seres humanos, por lo cual son de gran importancia en la industria agroalimentaria. En base a lo anterior el objetivo de este trabajo es sintetizar y caracterizar NPs Ag menores a 70 nm obtenidas mediante bio-reduccción con Eysenhardtia polystachya y determinar las propiedades inhibitorias contra Clostridium sp. La caracterización de las NPs Ag se realizó mediante espectroscopia UV- Vis, SEM/EDS y TEM, para las pruebas de sensibilidad antimicrobiana se realizaron las pruebas de Kirby-Bauer para halo inhibitorio, micro dilución en caldo para concentración mínima inhibitoria (CMI) y sembrado en placa para concentración mínima letal (CML). Se obtuvo una cinética de síntesis en la cual se muestra el límite de la reacción a las 48 h de ser iniciada, además de observar que la proporción adecuada para la formación de NPs Ag corresponde a 5 ml de extracto con 0.3 ml de solución de nitrato. Mediante SEM/EDS se confirma la presencia de plata en la muestra y debido al procedimiento de preparación, se observaron aglomerados de partículas. Con ayuda del TEM se observó que se forman nano-partículas esferoides con polidispersidad en un rango de 14 a 31 nm con un tamaño promedio de 22 nm. Finalmente, en las pruebas de sensibilidad antimicrobiana contra Clostridium sp, mediante el método de Kirby-Bauer se observó la formación de un halo de inhibición de 1 cm de diámetro, la CMI fue de 0.457 μg/mL, y el valor obtenido de la CML fue de 3.38 μg/mL. Con estos resultados se demuestra una efectividad de las NPs Ag obtenidas para inhibir el crecimiento y eliminar a la bacteria Clostridium sp, logrando todos los objetivos planteados en el inicio de este trabajo.