Detección de Neospora caninum mediante PCR en sangre y su asociación con la producción láctea en bovinos

Abstract

Neospora caninum es un protozoario perteneciente al Phylum Apicomplexa, es el agente causal de la neosporosis bovina, enfermedad considerada actualmente como la principal causa de aborto bovino alrededor del mundo, esta enfermedad además de producir abortos genera disminución en la producción láctea, y en los parámetros productivos y reproductivos. El objetivo de la presente investigación fue detectar a Neospora caninum mediante PCR en sangre y asociar el serostatus frente al parásito con la producción láctea en bovinos de un hato perteneciente al SPLPE del municipio de Amecameca, Estado de México. Se estableció el estado serológico frente al parásito mediante ELISA al inicio del estudio y se registró la producción láctea de las hembras en producción semanalmente durante 36 meses para posteriormente comparar la exposición a Neospora caninum y determinar la asociación con la producción de leche. Por otra parte, se realizaron cinco muestreos de manera mensual y se colectaron muestras sanguíneas de la vena caudal por medio de tubos al vacío con anticoagulante para la obtención glóbulos blancos con la finalidad de determinar la presencia del parásito utilizando la técnica de PCR anidado con iniciadores previamente publicados, adicionalmente, fueron analizados tejidos fetales con el mismo protocolo; fueron secuenciados amplicones obtenidos y comparados con los reportado en el Genbank; finalmente, se calculó la concordancia entre las pruebas ELISA y PCR. De 37 vacas en las que se registró la lactancia completa, el 27 % fue seropositivo en un estudio previo; estimando un promedio de producción de 3,755.1 Kg. de leche por lactancia para el grupo de vacas seropositivas y de 4,390.9 Kg para las vacas seronegativas lo que representó 12.31 y 14.39 kg de leche/vaca/día; el valor de la producción de leche fue de $22,530.00 pesos por lactancia para las vacas seropositivas y $26,345.40 pesos para las seronegativas. Se estimó una seroprevalencia del 81.8 % a Neospora caninum en el hato por medio de ELISA; por su parte, el porcentaje de animales positivos al parásito mediante la prueba de PCR anidado fueron de 55.8, 94.1, 100, 97.1, 100 para los meses uno al cinco, respectivamente, promediando 89.4 % en el periodo estudiado. Con respecto al tiempo de gestación, fueron positivas 13, 16, 15, 13, 14, 13, 11, 10, 6 vacas desde el primero al noveno mes respectivamente; también, resultaron positivas 41 vacas no preñadas (nueve recién paridas), siendo de 88.0, 88.9, 87.9 % las prevalencias por cada tercio de gestación. Hubo un 91-96 % de homología en las secuencias de los amplicones respecto a lo publicado. El índice Kappa fue de K= 0.41 entre ELISA y PCR. Se concluye que las vacas seropositivas a Neospora caninum de un hato perteneciente al sistema de producción de leche en pequeña escala del municipio de Amecameca producen menor cantidad de leche que las vacas seronegativas; por otra parte, se demostró la presencia de Neospora caninum mediante PCR anidado.