IDENTIFICACIÓN MORFOLÓGICA Y MOLECULAR DE EIMERIA SPP. EN OVINOS DE LA REGIÓN SUR-ORIENTE DEL ESTADO DE MÉXICO

Abstract

Dentro de las granjas de producción pecuaria, las enfermedades entéricas tienen un papel importante debido al impacto que ejercen sobre los factores productivos y económicos. En la producción ovina, las enteropatías son generalmente causadas por agentes parasitarios, entre los que se encuentran Trichuris spp., Nematodirus spp., Trichostrongylidae y Eimeria spp., siendo este último el más importante a nivel mundial. La coccidiosis causada por Eimeria spp. es una enfermedad de alta morbilidad, en ovinos, se han identificado once especies de Eimeria, siendo la microscopía la técnica de elección para la detección de ooquistes, sin embargo, esta técnica presenta ciertas limitantes que dificultan la identificación precisa de las diferentes especies de Eimeria, sobre todo por el sobrelapamiento de las características morfométricas que presentan. El objetivo del presente estudio fue identificar morfológicamente las once especies de Eimeria que infectan al ganado ovino en la región suroriente del Estado de México, así como obtener la secuencia parcial de la región ITS-1 del ARN ribosomal (ARNr) de cada especie e identificar la diversidad genética que presentan, en el periodo comprendido de febrero de 2016 a mayo de 2017, fueron recolectadas 40 muestras fecales procedentes de diversas producciones ovinas ubicadas en la región de estudio, a partir de las cuales se aislaron las once especies de Eimeria reportadas en ovinos, estas fueron cultivadas in vivo, utilizando once ovinos criollos libres de eimeriosis, a partir del día 26 post-inoculación, los ooquistes de cada una de las once especies fueron recuperados, y caracterizados por microscopia, 100 de cada una de ellas, fueron procesados para el análisis molecular, un fragmento de ~500pb de la región ITS1, fue amplificado, clonado y secuenciado para cada una de las once especies de Eimeria. Las secuencias de las once especies de Eimeria que infectan a los ovinos en México fueron depositadas en el GenkBank, bajo los números de acceso: MG774397 - MG774401 y MG836231 - MG836236. El análisis filogenético demostró que las especies reportadas en este estudio se asocian con las reportadas en mamíferos y se separan del grupo de las aves, visualizando el origen monofilético del grupo, es importante señalar que las Eimerias de ovinos se dividen en dos clados, los cuales, se sugiere, pueden estar IV asociados a la presencia o ausencia del cuerpo residual. En cuanto a las características morfométricas, el análisis de conglomerados por el método de Ward, con una distancia euclidiana cuadrada de 100, permitió separar las muestras en seis clusters, de los cuales únicamente el cluster VI contenía a las muestras correspondientes a E. intrincata, mientras que las muestras de las diez Eimerias restantes se agrupaban indistintamente en los clusters del I-V, conteniendo en promedio seis especies diferentes de Eimeria por cluster. En conclusión la identificación específica de las distintas especies de Eimeria en ovinos no se puede realizar únicamente con la utilización de técnicas convencionales como la microscopia, debido a los sobrelapamientos que presentan los ooquistes de las diferentes especies de Eimeria, al evaluar sus características morfométricas, por lo que se propone que la utilización de técnicas moleculares puede ser empleada eficazmente para el diagnóstico específico de cada especie de Eimeria, además se puede obtener información acerca de la epidemiología de la infección coccidial. Los resultados obtenidos en este estudio constituyen el primer reporte del aislamiento y cultivo de las once especies de Eimeria que infectan a los ovinos, de la misma manera, por primera vez, se reporta la región ITS-1 de cada una de las especies de Eimeria que infectan a los ovinos a nivel mundial