Evaluación de la respuesta inmune y las alteraciones seminales en la infección experimental con brucella ovis

Abstract

La brucelosis ovina es una enfermedad infecciosa que produce pérdidas en la ovinocultura, la Brucella ovis, es una bacteria que es capaz de vivir dentro de las células del huésped, lo que hace difícil su diagnóstico y control. En este trabajo se desafiaron experimentalmente carneros con B. ovis por las vías endovenosa y mucosal (lavado prepucial e instilación conjuntival) para evaluar la respuesta inmune humoral y celular, así como los cambios patológicos ocasionados por B. ovis sobre los órganos del aparato reproductor de los carneros desafiados. Se utilizaron 18 carneros de 1 a 4 años y libres de B. ovis; que se distribuyeron en tres grupos: Grupo 1 (n= 6): Control; Grupo 2(n= 6) inoculación en mucosas (B. ovis), y Grupo 3 (n= 6) inoculación vía intravenosa. Se evaluó la respuesta inmune serológica usando las técnicas de ELISA e IGDA. Se inunotipificaron por citometría de flujo poblaciones de linfocitos CD4 y CD8 a los 120, 150 y 189 dPI, y de WC1 (linfocitos ) a los 120 dPI. Se llevó a cabo el seguimiento de un carnero-1 grupo-1 durante 189 días d post-IE. Se obtuvieron muestras de 2 mL de suero sanguíneo, sangre entera y semen entre los d0 y 189 post-IE para realizar pruebas serológicas de Inmunodifusión en Gel de Agar (IGDA) y ELISA, el semen se procesó por la técnica de reacción en cadena de la polimerasa PCR. El análisis estadístico se realizó mediante modelos categóricos y mediciones repetidas. ELISA mostró mayor sensibilidad (P<0,05) para la detección de carneros seropositivos (CS) a partir del d 3 post-IE, a los 21 d post-IE, alcanzó su máxima detección de CS (100%) en ambos grupos IE (P<0,05). En el d 56 post-IE, la tasa de CS comenzó a descender (P<0,05). En 83% de los CS no se logró el aislamiento de B. ovis por cultivo bacteriano ni PCR. Se presentaron lesiones induradas: 50% en testículo derecho y 33,3% en testículo izquierdo, en carneros con IE vía endovenosa. En este grupo, el 16,6% de CS presentaron adherencias y granulomas en cabeza, cuerpo y cola del epidídimo derecho. La utilización de la prueba de IGDA, la cual es la establecida por la Norma Oficial Mexicana (NOM-041-ZOO-1995) imposibilitaría la detección temprana de animales seropositivos lo que restaría eficacia a los programas de control de la enfermedad. Así mismo se encontraron diferencias en las MIF de los linfocitos CD8 en el grupo control y el grupo endovenoso (p<0,05) a los 120 dPI, con medias de 1027,4 y 499,6 respectivamente. Estas diferencias se observaron también entre los carneros del grupo control y los grupos mucosal y endovenoso respectivamente para las MIF de los linfocitos CD4 (p<0,05) a los 189 dPI. Las poblaciones de linfocitos T (WC1) a los 120 dPI presentaron diferencias en MIF entre el grupo control y los grupos mucosal y endovenoso (p<0,05). Brucella ovis, puede modular la respuesta inmune del hospedero, los linfocitos CD4 y CD8 son importantes para la defensa del hospedero durante la infección causada por B. ovis, estos linfocitos pueden fluctuar durante la infección. Los linfocitos  podrían ser un factor importante para el control de la infección causada por B. ovis.